1、樹脂的選擇

　　當(dāng)目的物具有較強(qiáng)的堿性或酸性時口腔診所廢水處理設(shè)備廠家，宜選用弱酸或弱堿性的樹脂，這樣有助于提高選擇性并便于洗脫。如目的物是弱酸性或弱堿性的小分子物質(zhì)，往往選用強(qiáng)堿或強(qiáng)酸樹脂。對于大多數(shù)蛋白質(zhì)、酶和其他生物大分子的分離多采用弱酸或弱堿性樹脂，以減少生物大分子的變性，有利于洗脫，并提高選擇性。

　　2、層析柱

　　離子交換層析要根據(jù)分離的樣品量選擇合適的層析柱，離子交換用的層析柱一般粗而短，不宜過長。直徑和柱長比一般為1：10～1：50之間，層析柱安裝要垂直。裝柱時要均勻平整，不能有氣泡。

　　3、裝柱

　　先把柱內(nèi)裝滿起始緩沖液，用玻璃棒擠壓海綿，趕盡氣泡并把柱子垂直固定。將交換劑用起始緩沖液調(diào)稀攪勻后加入，柱內(nèi)的交換劑應(yīng)非常均勻地分布，不應(yīng)出現(xiàn)節(jié)面和氣泡，不能干柱，床面要平整，床高距柱頂2～3cm為宜。

　　4、平衡緩沖液

　　平衡緩沖液是指裝柱后及上樣后用于平衡離子交換柱的緩沖液。平衡緩沖液的離子強(qiáng)度和pH值的選擇首先要保證各個待分離物質(zhì)如蛋白質(zhì)的穩(wěn)定。其次是要使各個待分離物質(zhì)與離子交換劑有適當(dāng)?shù)慕Y(jié)合，并盡量使待分離樣品和雜質(zhì)與離子交換劑的結(jié)合有較大的差別。

　　5、上樣

　　離子交換層析的上樣時應(yīng)注意樣品液的離子強(qiáng)度和pH值，上樣量也不宜過大，一般為柱床體積的1%-5%(體積分?jǐn)?shù))為宜，以使樣品能吸附在層析柱的上層，得到較好的分離效果。將柱中的緩沖液逐漸放出，使頂部液面達(dá)到近于柱床面時開始加樣。用注射器或細(xì)長的玻管沿柱壁繞環(huán)加入酶樣，待樣液達(dá)一定高度后再在柱中間小心加樣。

　　6、洗脫緩沖液

　　在離子交換層析中一般常用梯度洗脫，通常有改變離子強(qiáng)度和改變pH值兩種方式。改變離子強(qiáng)度通常是在洗脫過程中逐步增大離子強(qiáng)度，從而使與離子交換劑結(jié)合的各個組分被洗脫下來;而改變pH值的洗脫，對于陽離子交換劑一般是pH值從低到高洗脫，陰離子交換劑一般是pH值從高到低。

　　7、洗脫速度

　　洗脫液的流速也會影響離子交換層析分離效果，洗脫速度通常要保持恒定。一般來說洗脫速度慢比快的分辨率要好，但洗脫速度過慢會造成分離時間長、樣品擴(kuò)散、譜峰變寬、分辨率降低等副作用，所以要根據(jù)實際情況選擇合適的洗脫速度。

　　8、樣品的濃縮、脫鹽

　　離子交換層析得到的樣品往往鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高，而且體積較大，樣品質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低。所以一般離子交換層析得到的樣品要進(jìn)行濃縮、脫鹽處理。另外在層析分離過程中還要注意操作手段和溶液環(huán)境，如溫度、壓力和緩沖系統(tǒng)對欲分離物質(zhì)穩(wěn)定性的影響，避免被分離物質(zhì)失活。